色谱广泛应用于各个领域,其中液相色谱更是以测定范围广、分离效率高、分析速度快和自动化程度高等特点在各个领域*瞩目。目前,液相色谱被广泛应用于医药、生化、化工、天然产物中主要组分的分析、食品分析、环境分析、农业分析、高分子材料的分析等。
接上一篇液相色谱应用一实例,小通继续为你们实例讲解。
例4.植物甾醇分析(生物制药)
样品:含β-谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇、菜籽甾醇和胆固醇的混合物
色谱仪:某液相色谱仪,配有色谱工作站
检测器:Alltech2000型ELSD蒸发光散射检测器
漂移管温度为70℃,氮气流速1.6L/min
色谱柱:SupecolDiscoueryC18,5μm,柱长25cm,柱径4.6mm
流动相:甲醇
流速:1mL/min
进样:10μL
结果:所有组分在19min之内全部流出,各组分*分离,组分流出顺序为:峰1为菜籽甾醇保留时间13.70min,峰2为胆固醇保留时间14.62min,峰3为豆甾醇保留时间15.45min,峰4为菜油甾醇保留时间15.97min,峰5为β-谷甾醇保留时间17.05min。
例5.磷脂分析(生物)
样品:含磷脂酰肌醇等4种物质混合物
色谱仪: 某液相色谱仪,四元梯度泵,色谱工作站
检测器:500型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为120℃,氮气流速为2.7L/min。
色谱柱:RosilNH2,5μm,柱长15cm,柱径4.6mm
流动相:A为无水乙醇,B为0.2mol/L的草酸溶液
梯度:时间0min15min30min30.1min35.1min
A95%85%85%95%95%
B5%15%15%5%5%
流速:1.5mL/min
进样:10μL
结果:所有组分在35min之内全部流出,各组分*分离,组分流出顺序为:峰1为磷脂酰乙醇胺,峰2为磷脂酰丝氨酸,峰3为磷脂酰胆碱,峰4为磷脂酰肌醇。
例6.维生素分析(食品分析)
样品:含维生素A等5种物质的混合物
色谱仪:某液相色谱仪,配有工作站
检测器:500型ELSDAlltech蒸发光散射检测器
漂移管温度为70℃,氮气流速为2.0L/min
色谱柱:AdsorbosphereC18,5μm,柱长25cm,柱径4.6mm
流动相:甲醇:乙醇=97:3
流速:1mL/min
进样:20μL
结果:所有组分在21min之内全部流出,各组分*分离,组分流出顺序为:峰1为维生素A,峰2为维生素D2,峰3为维生素D3,峰4为维生素E,峰5为维生素K1。