液相色谱仪是属于易学难用的仪器,特别讲究 “正确使用” 和经验。液相工作者接触最多的是流动相,流动相是造成液相色谱各种问题的主要源头。液相色谱仪最常见的故障一是堵,二是漏。
“堵”的原因之一:配制流动相时细菌污染。
堵塞的主要位置就是在液相色谱仪色谱柱的前端,最主要原因就是流动相里有杂质,杂质的主要来源就是细菌。
首先我们要认识到,一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理,直接使用没有问题。即使是有些固态微粒杂质,也能在液相流路系统最前端的过滤头上排除,真正容易引起问题的,是水中的细菌。新制备的纯水在室内放置几天就会长菌,而这些细菌虽然肉眼不可见,却足以堵塞柱填料颗粒的空隙,造成柱子很快报废。时间过久,滤头黏附细菌导致泵液不准
解决液相色谱仪“堵”的方法很简单,就是确保水的可靠性。这里有两种方式推荐:
(1)购买实验室专用纯水机,既方便又可靠,质量也放心。缺点就是价格不菲。
(2) 成箱购买市售品牌纯净水,如500ml 一支的怡宝或娃哈哈,这些水的质量足以应付液相色谱的要求。
这里特别指出一个细节:在绝大多数书本上,凡谈到配制流动相都会谈到最后有一个过滤的步骤。
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