流动相溶剂瓶的保养

溶剂瓶是流动相的起点，通常盛放水相或有机相溶液。

1.对于水相溶液，首要的问题是防止污染。对于溶剂瓶我们要勤换流动相，常换常新。

2.对于有机相溶液，有机相易发生聚合，特别是乙腈在适宜的光照条件下极易发生聚合，瓶中会出现絮状的聚合沉淀物。

为防止聚合，盛装乙腈时要用棕色溶剂瓶，避免阳光直射，更换乙腈时应弃去瓶底剩余的溶液。

3.清洗过滤，溶剂瓶的过滤头，其作用是防止溶液瓶中的颗粒杂质进入仪器流路系统，其材质通常分为玻璃烧结石英和不锈钢，如果不慎堵塞会造成流动相吸液不畅，因此必须进行清洗。

玻璃材质的通常用稀硝酸泡，而不锈钢材质的可直接进行超声清洗。

高压泵的保养

泵是液相色谱的核心。泵将流动相从溶剂瓶输送到液相流路系统中，并要在高压下保持流量和压力的稳定。

状态正常的高压泵是液相色谱准确分析的基础，所以要重视对泵的维护。

1泵压力波动，很多情况下，泵的问题反映在压力上，压力波动是常见的一类问题。通常可通过重新清洗流路和再次脱气流动相加以解决。

2过滤白头保养，泵的维护还有一项常做的工作是更换清洗阀上的过滤白头，通常判断的标准是纯水以5mL/min流速清洗时，如果压力超过1MPa则考虑更换。

进样器的保养

进样器分手动和自动两大类，虽然两者工作模式不同，但使用要点基本一致。

1.防止交叉污染，自动进样器常见的问题是交叉污染，交叉污染产生的原因是，样品残留在进样针内外表面，并随下一次进样进入色谱系统。要解决交叉污染，主要靠清洗。

2.精细操作，手动进样器的操作要点大致相同，应使用液相色谱专用进样针，进样时插针应插到底，不使用时将针头留在进样器内，使用前后都要及时清洗。

色谱柱的保养

色谱柱是化合物分离的关键。保养良好的色谱柱具有很高的塔板数，且仪器基线平稳。

1.避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会影响柱内填料，因此在调节流速时应缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。

2.应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。

3.色谱柱反冲，纳谱分析小分子分离液相色谱柱ChromCore系列和EcoPak系列色谱柱可以反冲；纳谱分析手性色谱柱UniChiral系列色谱柱可以反冲，反冲可除去留在柱头的杂质。但是纳谱分析生物大分子液相色谱柱BioCore系列色谱柱不要反冲，否则反冲会迅速降低柱效。

4.选择使用适宜的流动相（尤其是pH），以避免固定相被破坏。可在进样器前连接预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和"，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。

5.避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需对样品进行预处理或在进样器和色谱柱之间连接保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱应经常更换。

6.经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50~75mL。

7.保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。

8.色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或取出清洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。

在后两种情况发生时，小心拧开柱接头，用洁净小钢将柱头填料取出1~2mm高度（注意把被污染填料取净），再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相（与柱内相同）填满色谱柱，压平，再拧紧柱接头。

检测器的保养

1、光源部分

检测器中非常重要的部件是光源，光源对发射能量有要求，一旦能量衰减到一定程度，就会出现基线噪声变大、灵敏度降低等问题，因此光源是一个消耗品。通常紫外灯的寿命是2000h，要特别关注灯的能量状况。

可通过仪器维护软件中自带的“灯能量测试"功能来判断，测试的结果会分别评估低、中、高三个波长段的能量，一旦某个波长段的测试结果显示失败，就表示需要更换灯。

2、检测池

检测器中另一重要部件是检测池，也叫流通池。通常大家关心的问题是检测池被堵掉，因为检测池通常不耐压，所以一旦被堵就很可能造成损坏。

事实上检测池通常不容易被堵，原因是几乎所有的颗粒杂质都会被色谱柱拦截，所以堵塞检测器的物质基本都不是来自样品，很可能是后来“产生"的，比如含盐流动相残留在检测池中导致盐析出。

废液的处置

液相色谱仪的废液大部分含有有机溶剂，会对人体产生一定的危害，对环境也会产生污染，严禁随意倾倒，应及时处理。目前，国内大部分实验室是将废液送到专门的废液处理站集中进行无害化处理。